无缝克隆的10 μl反应体系中,2-3 个组装片段总加入量建议在0.03-0.2 pmol,4-6 个组装片段总加入量建议在0.2-0.5 pmol。

计算线性化片段(包括载体和插入片段)的使用量,推荐以下计算公式:

线性化片段用量(ng)=皮摩尔数(pmols) × 碱基对数(bp)× 0.65 kDa

注:最优反应体系通常含有载体50-100 ng,各插入片段的摩尔数是载体的2-3倍。

任意输入两个参数:线性化片段的用量、pmols数、片段碱基对数,计算第三个参数结果。

ng

(线性化片段)

=
pmols
bp

(碱基对数)

0.65kDa
计算结果 线性化片段质量 pmols 碱基对数